羊口疮病毒陕西分离株B2L基因的克隆、序列分析及原核表达

编号 zgly0001516758

文献类型 期刊论文

文献题名 羊口疮病毒陕西分离株B2L基因的克隆、序列分析及原核表达

作者 何亚鹏  张琪  庞文静  徐丽美  付明哲  许信刚 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2016年12期

年份 2016 

分类号 S852.654 

关键词 羊口疮病毒  B2L基因  克隆  序列分析  原核表达 

文摘内容 为了对羊口疮病毒(ORFV)陕西分离株B2L基因进行克隆、序列分析及原核表达,根据GenBank已登录的ORFV(JN565694.1)B2L基因序列,设计合成一对特异性引物,应用PCR技术扩增ORFV B2L基因,并将目的基因连接到原核表达载体pET-28a中,成功构建重组质粒PET28a-B2L,转化大肠埃希菌BL21感受态细胞进行诱导表达,并进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果表明,成功克隆了ORFV陕西分离株B2L全基因序列,核苷酸序列分析表明,陕西分离株B2L基因与国内外已报道的ORFV毒株核苷酸同源性超过97.3%,氨基酸同源性超过95.0%。重组菌经IPTG诱导后成功表达分子质量约为42ku的重组蛋白,该蛋白能与羊口疮阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性。研究结果为ORFV的分子生物学特性研究提供资料,为进一步研制ORFV单克隆抗体及抗体检测ELISA试剂盒奠定了基础。