蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达

编号 zgly0001374175

文献类型 期刊论文

文献题名 蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达

作者 秦平伟  段明革  孙文婷  李名扬  徐晶 

作者单位 西南大学园艺园林学院  重庆市花卉工程技术研究中心  重庆城市管理职业学院 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2010年S2期

年份 2010 

分类号 S685.99 

关键词 金属硫蛋白  克隆  序列分析  原核表达 

文摘内容 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含Cys,能够结合重金属的低分子量蛋白质,广泛分布于生物界。在构建好的蜡梅花cDNA文库并进行EST分析的基础上,通过随机克隆测序得到了1个蜡梅金属硫蛋白的cDNA,命名为CpMetallothionein(CpMT)。CpMTcDNA全长为1083bp,基因内部含有一长度为240bp的开放阅读框,可编码79个氨基酸残基。将CpMT插入原核表达载体pET-32a,并转化Origami2感受态细胞。诱导表达产物经SDS-PAGE结果显示,目的蛋白约为30kD。表达的融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白2种形式存在,用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒对其进行纯化回收,得到了高纯度蛋白,为今后研究奠定基础。