葡萄iPBS-PCR反应体系的优化

编号 zgly0000849330

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄iPBS-PCR反应体系的优化

作者 张潇玉  郭大龙  郭明晓  张国海  侯小改 

作者单位 河南科技大学林学院  河南科技大学农学院 

母体文献 果树学报 

年卷期 2014(3)

页码 508-513

年份 2014 

关键词 葡萄  iPBS  正交设计  体系优化 

文摘内容 【目的】iPBS标记是一种新型、快速、高效的分子标记方法,试验筛选并优化了葡萄的iPBS-PCR反应体系,以建立葡萄种质资源评价和品种鉴定的可靠方法。【方法】采用L16(45)正交试验,对影响葡萄iPBS-PCR反应的模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物用量及退火温度等因素进行了优化,运用Bandscan和正交设计助手等软件对电泳结果条带进行统计分析。【结果】优化后的葡萄iPBS-PCR扩增的最佳反应条件为:DNA模板20 ng、Taq酶1.00 U、Mg2+2.40 mmol·L-1、引物0.50μmol·L-1、dNTPs 0.20 mmol·L-1,总体积20μL。