柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的克隆、序列分析与原核表达

编号 zgly0001469901

文献类型 期刊论文

文献题名 柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的克隆、序列分析与原核表达

作者 刘田  廖申权  戚南山  吴彩艳  李娟  吕敏娜  李国清  孙铭飞 

作者单位 华南农业大学兽医学院  广东省农业科学院动物卫生研究所 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S852.723 

关键词 柔嫩艾美耳球虫  葡萄糖-6-磷酸异构酶  克隆  原核表达 

文摘内容 为研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,G6-PI)的生化特性,本研究对其基因进行了克隆和原核表达。根据NCBI已公布的E.tenella Houghton株G6-PI的基因序列(GI:298161921)设计特异性引物,运用RT-PCR方法扩增EtG6-PI基因序列,并将其克隆到表达载体pColdI、pCold43a中,构建重组质粒pColdIEtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞E.coli Rosetta(DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明,E.tenella G6-PI的ORF序列(1650 bp),编码550个氨基酸;重组菌pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI均能成功诱导表达,其中pCold43a-EtG6-PI表达部分可溶性蛋白,表达产物纯化后可用于酶生化特性分析。柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的成功克隆表达为该酶的功能研究奠定了基础。