林麝IL-2细胞因子的克隆、表达和纯化

编号 zgly0000472881

文献类型 期刊论文

文献题名 林麝IL-2细胞因子的克隆、表达和纯化

作者 赖彬  徐柳  岳碧松  邹方东 

作者单位 生物资源与生态环境教育部重点实验室  西南交通大学生物工程学院 

母体文献 四川动物 

年卷期 2006,25(4)

页码 713-717

年份 2006 

分类号 Q959.8  Q813 

关键词 林麝白介素-2  克隆  原核表达 

文摘内容 用林麝(Moschus berezovskii)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)提取总RNA, RT-PCR扩增IL-2(interleukin-2, IL-2), 连接pMD18-T载体后转化大肠杆菌, 筛选阳性克隆并测序。然后将IL-2成熟肽编码序列连接到pGEX4T-1原核表达载体进行表达、纯化。结果表明林麝IL-2开放阅读框全长468bp, 编码155个氨基酸。序列分析表明, 林麝IL-2及其受体结合域与水牛的高度保守, 而在翻译后修饰的预测活性位点上和水牛的有所不同。IFFG诱导林麝IL-2蛋白表达, 得到约41kD的目标带; 优化表达后, 林麝IL-2表达含量达到了总蛋白量的25%。经GST亲和柱分离纯化, 得到了约41kD的单一目标带, 这说明林麝IL-2基因的原核表达成功。