植物内生蜡样芽孢杆菌M22 Mn-SOD基因的克隆及在大肠杆菌中表达

编号 zgly0001281705

文献类型 期刊论文

文献题名 植物内生蜡样芽孢杆菌M22 Mn-SOD基因的克隆及在大肠杆菌中表达

作者 尚玉磊  陈惠芳  王黎明  王勇军  王琦  张炳欣  梅汝鸿 

作者单位 浙江大学农业与生物技术学院  中国农业大学农学与生物技术学院  中国农业大学农学与生物技术学院 杭州 310029  北京 100094  杭州 310029  北京 100094 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2004年06期

年份 2004 

分类号 Q78 

关键词 蜡样芽孢杆菌  锰超氧化物歧化酶基因  克隆  测序  原核表达 

文摘内容 通过PCR和反向PCR,从蜡样芽孢杆菌M22中扩增到2条长度为1 322 bp和1 395 bp的基因片段(GenBank登录号为AY540749和AY468485),分别含657 bp和627 bp的开放阅读框,各自编码218个和208个氨基酸残基的功能蛋白。2个蛋白氨基酸序列同源性为46％,均不含信号肽。与其它锰超氧化物歧化酶序列同源性高,保守氨基酸残基类型及位置与其它Mn-SOD相同,可确定2个基因均为蜡样芽孢杆菌Mn-SOD基因。分别将2个基因的开放阅读框插入载体pET-22b(+)构建表达质粒pET-sodA,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达。SDS-PAGE显示融合蛋白相对分子质量分别为28 kD和27 kD。转入pET-sodA的SOD缺陷型大肠杆菌QC779转化子恢复在10μmol/L paraquat的LB平板上生长的能力。活性电泳显示,M22的Mn-SOD在QC779中成功表达。