毛果杨苯丙氨酸解氨酶活性比较及肉桂酸制备

编号 zgly0001685467

文献类型 期刊论文

文献题名 毛果杨苯丙氨酸解氨酶活性比较及肉桂酸制备

作者 张晨  臧颖  许倩  郑兆娟  欧阳嘉 

作者单位 南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心  南京林业大学化学工程学院  南京林业大学林学院 

母体文献 南京林业大学学报(自然科学版 

年卷期 2020年01期

年份 2020 

分类号 S792.11  O625.511 

关键词 毛果杨  苯丙氨酸解氨酶  酶学性质  肉桂酸  原核表达 

文摘内容 【目的】苯丙氨酸解氨酶(PAL)在苯丙烷代谢途径中具有重要作用,Ptr PAL基因的挖掘、酶学性质分析和应用为毛果杨苯丙烷代谢途径的研究和肉桂酸(t-ca)合成提供参考。【方法】基于基因组注释信息,挖掘毛果杨Ptr PAL基因,进行原核表达和酶学性质分析。以L-苯丙氨酸(L-Phe)为底物,通过全细胞催化合成t-ca。【结果】通过挖掘毛果杨基因组得到了5个Ptr PAL基因,系统发育树分析表明其在进化上分为两组。Ptr PAL3和PtrPAL4来自不同进化分支,选取其进行原核表达和酶学性质分析。镍柱纯化后的重组蛋白re PtrPAL3和re PtrPAL4最适温度分别是55℃和60℃,最适p H分别是8.5和8.0,比酶活分别为3.363和3. 381 U/mg,且均具有微弱的酪氨酸解氨酶活力。重组蛋白的动力学分析表明,re PtrPAL3对L-Phe的亲和力更高。将re PtrPAL3应用于L-Phe脱氨生产t-ca,全细胞催化7 h可产生104 mmol/L t-ca。【结论】具有不同转录特异性的两种re PtrPAL酶学性质接近,但re PtrPAL3表现出更高的催化效率,更适合用于t-ca的生物合成。而且,其产量高于文献报道的28 mmol/L水平,具有良好的应用潜力。