弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的重组表达和特异性单克隆抗体制备

编号 zgly0001517099

文献类型 期刊论文

文献题名 弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的重组表达和特异性单克隆抗体制备

作者 白宇  李培德  胡景炎  何杰  陈欢利  吴春琴  金俊杰 

作者单位 温州科技职业学院 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2016年03期

年份 2016 

分类号 S852.7 

关键词 弓形虫  卵囊壁蛋白1  重组表达  单克隆抗体 

文摘内容 为研究制备弓形虫卵囊壁蛋白和特异性单克隆抗体,以弓形虫弱毒株ME49株DNA为模板,应用PCR技术扩增卵囊壁蛋白OWP1基因,将其克隆至原核表达载体构建重组表达质粒p ET-28a-OWP1,经过IPTG诱导表达和His纯化树脂纯化重组蛋白His-OWP1。重组蛋白His-OWP1作为免疫原,免疫7周龄雌性BALB/c小鼠,重组蛋白GST-OWP1作为检测筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的单克隆抗体。结果表明,获得2株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株(4A2和2C10)。Western blot结果表明研究制备的单克隆抗体能够识别重组表达蛋白。制备获得的2株稳定性好、效价高的单克隆抗体,可为今后研究特异敏感的弓形虫病血清学检测方法提供材料。