家蝇半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI的克隆、表达及活性检测

编号 zgly0001381451

文献类型 期刊论文

文献题名 家蝇半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI的克隆、表达及活性检测

作者 柳峰松  董晓寅  张瑞英  唐婷 

作者单位 河北大学生命科学学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2010年06期

年份 2010 

分类号 Q78 

关键词 家蝇  半胱氨酸蛋白酶抑制剂  克隆  重组表达  抑制活性 

文摘内容 半胱氨酸蛋白酶抑制剂是具有抑制半胱氨酸蛋白酶活性的一类蛋白超家族。本研究根据EST序列信息,通过RACE技术克隆得到1条家蝇Musca domestica半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI,该基因含有1个357bp开放阅读框,编码118个氨基酸残基,推导的多肽N端17个氨基酸残基为信号肽序列。同源分析表明,MdCPI氨基酸序列与红尾肉蝇Sarcophaga crassipalpis的CPI相似性最高(identity=51%)。以邻接法(NJ)构建的系统树表明,家蝇与其他双翅目昆虫CPI起源于共同的祖先,属于I25A型蛋白家族。为了解家蝇CPI对半胱氨酸蛋白酶的抑制活性,构建pET-17b-MdCPI表达载体,并转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)进行重组表达。研究发现1μg重组家蝇CPI能够抑制约14μg木瓜蛋白酶的水解活性。结果表明MdCPI确属CPI家族,可能同其他家族成员具有相似的功能,参与免疫及生理调控。这些结果为研究MdCPI在家蝇体内作用机制奠定了基础。