均匀设计优化喜盐鸢尾ISSR-PCR体系

编号 zgly0000599435

文献类型 期刊论文

文献题名 均匀设计优化喜盐鸢尾ISSR-PCR体系

作者 杜欣  董玉芝  陈虹 

作者单位 新疆农业大学林学院  新疆农业大学农业生物技术重点实验室／新疆大学农学院 

母体文献 新疆农业科学 

年卷期 2008,45(3)

页码 386-392

年份 2008 

分类号 S580.353 

关键词 喜盐鸢尾  均匀设计  ISSR-PCR 

文摘内容 以新疆野生喜盐鸢尾DNA为模板，采用U20(S^4)和U12(3^4)均匀设计表，通过4因素5水平和4因素3水平两轮均匀优化试验，对影响ISSR-PCR扩增结果的一些因素如Mg^2＋、dNTP、引物以及TaqDNA聚合酶浓度以及循环数和退火温度等进行优化筛选，建立了适合喜盐鸢尾的最佳ISSR-PCR反应体系：在25止反应体系中，包括2．5μL10×PCRBuffer，2．0mmol／LMg^2＋，250／μmol／LdNTP，0．1／nnol／L引物，0．5uTaqDNA聚合酶，40ng模板DNA。扩增程序为：94℃预变性3min；接着进行40个循环：94℃变性45s，52．1℃退火30s，72℃延伸1．5min；循环结束后，72℃延伸5min，4℃保存。