应用均匀设计优化文冠果ISSR-PCR反应体系

编号 zgly0000879960

文献类型 期刊论文

文献题名 应用均匀设计优化文冠果ISSR-PCR反应体系

作者 张芸香  刘晶晶  白晋华  郭红彦  郭晋平 

作者单位 山西农业大学林学院 

母体文献 山西农业大学学报;自然科学版 

年卷期 2014(3)

页码 241-244+248

年份 2014 

关键词 文冠果  ISSR-PCR  均匀设计 

文摘内容 采用均匀设计,对引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg2+浓度和dNTP浓度4个因素分别设置5个水平,对文冠果ISSR-PCR反应体系进行优化,在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测,构建了文冠果ISSR-PCR优化反应体系,在20μL ISSR-PCR反应体系中,各因素的最佳浓度分别为:2×PCR buffer、0.2mmol·L-1 dNTP、0.3μmol·L-1引物、2.5mmol·L-1 Mg2+和0.4UTaqDNA聚合酶,进一步对扩增程序中的循环次数和退火温度,以及ISSR引物进行筛选,获得的扩增程序为:94℃预变性5min。