基于CRISPR系统的双孢蘑菇基因编辑体系建立及应用

编号 zgly0001714274

文献类型 期刊论文

文献题名 基于CRISPR系统的双孢蘑菇基因编辑体系建立及应用

作者 吕阳  贺晓飞  王佩  刘世玲  韩少鹏  曾弓剑  周雁  沈祥陵 

作者单位 三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室  宜昌市农业科学研究院  华中农业大学应用真菌研究所 

母体文献 食用菌学报 

年卷期 2020年03期

年份 2020 

分类号 S646 

关键词 双孢蘑菇  基因编辑  遗传转化  多酚氧化酶 

文摘内容 根据CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas(CRISPR-associated)基因编辑技术,设计AbPPO4特异性导向RNA,构建双孢蘑菇(Agaricus bisporus)基因编辑载体pAbGEB1-AbPPO4,再通过农杆菌介导转化双孢蘑菇菌丝体建立基因编辑体系,观察菌丝生长状况。结果表明:获得12株转化子,1号和7号的菌丝体中存在潮霉素抗性基因,且AbPPO4基因的相对表达量较低,分别为0.28±0.04和0.47±0.02,与对照组相比,组间差异均具有统计学意义(P<0.05),说明1号和7号转化子的菌丝体AbPPO4基因表达受到了抑制;与对照组相比,1号和7号转化子的菌丝体中AbPPO4基因均发生了突变,1号和7号分别产生了4 bp和11 bp的碱基缺失,证明设计的CRISPR/Cas9系统在双孢蘑菇内对AbPPO4基因成功地进行了编辑;同时发现AbPPO4基因突变后对双孢蘑菇菌丝体的生长产生了不利影响。