编号 zgly0001398321
文献类型 期刊论文
文献题名 柑橘溃疡病菌抗铜相关基因copA和copB的克隆及原核表达
作者单位 华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
母体文献 植物病理学报
年卷期 2011年03期
年份 2011
分类号 S436.661
关键词 抗铜基因 PCR 原核表达 Western blot 柑橘溃疡病菌
文摘内容 以柑橘溃疡病菌DNA为模板,对抗铜相关基因copA和copB进行了PCR扩增和克隆,获得了大小分别为1 782 bp和1 095 bp的目标片段。构建了这2个基因的原核表达载体(pET-copA和pET-copB),并在大肠杆菌[Escherichia coliBL21(DE3)]中成功诱导表达。利用原核表达的融合蛋白免疫大耳白兔,制备了抗copA和copB原核表达蛋白的多克隆抗体。用间接ELISA法测定了所制备的多克隆抗体的效价均为1∶6 400。用所制备的抗体分别对copA和copB的原核表达产物进行Western blot分析的结果显示,在相应位置产生了较强的免疫反应条带,表明所制备抗体能特异性地与相应的抗原发生免疫反应。