兔出血症病毒YL株衣壳蛋白VP60基因在原核系统中的高效表达

编号 zgly0001330698

文献类型 期刊论文

文献题名 兔出血症病毒YL株衣壳蛋白VP60基因在原核系统中的高效表达

作者 李传山  任力刚  李维英  杨增岐  郭蔼光 

作者单位 西北农林科技大学生命科学学院  西北农林科技大学林学院  西北农林科技大学动物科技学院  西北农林科技大学生命科学学院 陕西杨凌712100  陕西杨凌712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2007年11期

年份 2007 

分类号 S852.5 

关键词 兔出血症病毒(RHDV)  衣壳蛋白(VP60)基因  原核表达  Western blot 

文摘内容 为了在原核系统中高效表达兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60,应用RT-PCR方法从兔出血症病毒(RHDV)西北分离株YL中克隆出了衣壳蛋白VP60基因并测序,结果显示,YL株VP60基因全长1740 bp,GC含量为55.3%,已在GenBank中注册(登录号为DQ530363),VP60基因与中国RHDV最早期分离株WX84的VP60基因核苷酸序列同源性为93.0%,氨基酸序列同源性为95.8%。构建成功YL株VP60基因原核表达载体VP60-pET32a,转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中。1 mmol/L IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示,VP60融合蛋白分子质量约为75 ku,其表达量占总菌体蛋白的39.8%。Western blot检测结果表明,VP60融合蛋白可以和RHDV抗血清发生特异反应。本研究结果显示,兔出血症病毒在干旱半干旱条件下的遗传变异和免疫学特征无较大变化。