结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达

编号 zgly0001487655

文献类型 期刊论文

文献题名 结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达

作者 刘杨  宋纪伟  曾范利  时坤  李健明  杜锐 

作者单位 吉林农业大学动物科学技术学院  吉林市人民医院  吉林农业大学中药材学院  教育部动物生产及产品质量安全重点实验室吉林省药用动物二级实验室 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年05期

年份 2015 

分类号 S852.618 

关键词 结核分支杆菌  Rv3117基因  克隆  原核表达 

文摘内容 以结核分支杆菌H37Rv株染色体DNA为模板,应用Rv3117基因特异性引物对该基因进行PCR扩增,获得约800bp的DNA片段。将PCR纯化产物克隆至pMD-18T Vector中,构建出重组质粒pMD-18T-Rv3117。以EcoRⅠ和SamⅠ双酶切pMD-18T-Rv3117重组载体和pGEX-4T-1原核表达载体,并将纯化的Rv3117基因亚克隆至pGEX-4T-1中,构建出原核重组表达质粒pGEX-4T-1-Rv3117。将pGEX-4T-1-Rv3117重组质粒转化至感受态E.coli BL21中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30ku目的蛋白带。Western blot分析结果显示,该蛋白能与抗结核分支杆菌阳性血清发生特异性反应。研究结果为结核病临床诊断抗原的筛选奠定了基础。