葡萄芪合酶基因cDNA片段酵母表达载体的构建及其在酿酒酵母中的表达

编号 zgly0001318884

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄芪合酶基因cDNA片段酵母表达载体的构建及其在酿酒酵母中的表达

作者 刘林丽  王跃进 

作者单位 西北农林科技大学生命科学学院  西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2007年12期

年份 2007 

分类号 Q78 

关键词 芪合酶  酵母表达载体  载体构建  诱导表达 

文摘内容 应用基因重组技术,将从华东葡萄白河-35-1中分离出的长1179 bp芪合酶(stilbene synthase,STS)基因的cDNA片段克隆入大肠杆菌-酵母菌穿梭型诱导表达载体pYES6/CT上,构建重组酵母真核表达质粒pYES6/CT-STS,转化酿酒酵母菌株INVSc1,用Blasticidin(bsd)筛选出阳性克隆转化子,经半乳糖诱导表达后进行5个时间段菌体全蛋白SDS-PAGE电泳和Western-blot分析。结果发现,诱导4 h后开始有目标带(48 ku)出现,诱导16 h开始大量且稳定表达。证明目的基因片段可以在酿酒酵母中表达,为后续基因功能的验证奠定了基础。