银松素合酶基因地高辛标记RNA探针的合成

编号 zgly0000476380

文献类型 期刊论文

文献题名 银松素合酶基因地高辛标记RNA探针的合成

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郭晋隆  叶冰莹  黄庆煌  黄国强  许玉芬  林志楷  陈由强  陈如凯 

作者单位 农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室  福建师范大学生命科学学院  发育与神经生物学福建省高等学校重点实验室 

母体文献 生物技术通讯 

年卷期 2006,17(6)

页码 891-894

年份 2006 

分类号 Q943 

关键词 银松素合酶基因  探针  马尾松  芪合酶 

文摘内容 目的: 体外转录合成银松素合酶(PS)基因地高辛标记反义RNA探针。方法: 通过双酶切把PS cDNA全长序列接到pBlueskript Ⅱ KS(+)的多克隆位点上; 同时, 经由NCBI比对确定PSeDNA的特异序列。设计含有Sal Ⅰ和Xba Ⅰ这2个酶切位点的上、下游引物, 用PCR法扩增含有该位点的目的片段, 并连接到pBlueskript Ⅱ KS(+)的多克隆位点上; 最后利用pBlueskript Ⅱ KS(+)上的启动子T7, 用T7 RNA聚合酶在体外转录合成地高辛标记PS全长及特异序列的反义RNA探针。结果: 通过对构建探针的单、双酶切, PCR及电泳鉴定, 表明成功合成了PS基因地高辛标记的全长及特异序列的反义RNA探针。结论: RNA探针的合成为后续马尾松Ps基因表达的RNA原位杂交研究打下了基础。