编号
zgly0000890458
文献类型
期刊论文
文献题名
康氏木霉HEX1蛋白的原核表达及纯化
作者单位
阜阳师范学院生命科学学院
上海交通大学农业与生物学院
山东省淄博市桓台县林业局
母体文献
西北农林科技大学学报;自然科学版
年卷期
2014(10)
页码
147-151
年份
2014
关键词
康氏木霉
HEX1
原核表达
蛋白纯化
文摘内容
【目的】对康氏木霉HEX1蛋白进行原核表达和纯化,为进行抗体制备及深入研究HEX1功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增康氏木霉hex1基因,构建pMD19-T-hex1重组克隆质粒,在此基础上构建pET28a-hex1表达载体,转化E.coli BL21(DE3)细胞。通过IPTG诱导表达,对重组HEX1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定。【结果】成功克隆了长660bp的hex1基因并构建了融合表达载体,HEX1蛋白在IPTG诱导下得到表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,能与抗His标签的兔多克隆抗体发生特异性反应,并纯化出了融合表达蛋白。