梾木属SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

编号 zgly0001478524

文献类型 期刊论文

文献题名 梾木属SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

作者 张良波  王解香  李培旺  陈景震  顾佳宁  李昌珠  康向阳 

作者单位 北京林业大学  湖南省林业科学院  湖南生物柴油工程技术研究中心 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2014年05期

年份 2014 

分类号 S792 

关键词 梾木属  SRAP  正交设计  反应体系  引物筛选 

文摘内容 本研究利用Me2Em4正反向引物组合对影响梾木属SRAP-PCR反应体系的Mg2+、Taq聚合酶、dNTP和引物浓度4个因素进行L9(34)正交试验,采用正交设计直观分析及方差分析对影响SRAP反应的4个因素进行分析,并对模板DNA浓度进行了单因素试验分析。结果表明,梾木属SRAP-PCR 20μL反应体系的最佳组合为:Taq聚合酶2.0 U、Mg2+浓度1.5 mmol/L、dNTP浓度0.15 mmol/L、Primer浓度0.30 mmol/L、模板DNA浓度5.5 mg/L以及含有2μL不含Mg2+的10倍稀释缓冲液。各因素对梾木SRAP-PCR反应的影响大小依次为:dNTP、Taq聚合酶、Mg2+和Primer。最后运用优化体系从100对SRAP引物组合中筛选出26个多态性SRAP标记,可用于梾木属不同种间亲缘关系、系统进化和遗传多样性等方面的研究。