杜仲Fls基因的克隆及原核表达

编号 zgly0000831507

文献类型 期刊论文

文献题名 杜仲Fls基因的克隆及原核表达

学科分类 220.45;经济林学

作者 常立  李周岐  李煜  王淑惠 

作者单位 西北农林科技大学林学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2014(4)

页码 102-108

年份 2014 

分类号 Q943.2 

关键词 杜仲  基因克隆  Fls基因  原核表达 

文摘内容 【目的】:克隆杜仲黄酮醇合成酶基因(Fls)全长, 对其开放阅读框(ORF)进行原核表达分析。【方法】:以杜仲叶片为材料提取总 RNA, 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和 cDNA 末端快速扩增(RACE)技术克隆杜仲Fls基因; Fls基因的 ORF 经限制性内切酶酶切, 构建其原核表达载体 pET-28a-Fls; 最后利用 IPTG 诱导Fls基因在大肠杆菌 BL21(DE3)中表达。【结果】:获得了黄酮醇合成酶基因全长序列, 长度为1 220 bp, ORF 为1 011 bp, 编码336个氨基酸; 成功构建了原核表达载体 pET-28a-Fls; 利用 IPTG 诱导Fls在 BL21(DE3)中表达, SDS-PAGE 电泳结果显示, 在约44 ku 处有特异性的蛋白条带出现。【结论】:获得了杜仲Fls基因的全长和 ORF, 并成功对其进行了原核表达。