麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆和表达

编号 zgly0000310259

文献类型 期刊论文

文献题名 麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆和表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 林娟  陈钰  徐莺  颜钫  唐琳  陈放 

作者单位 四川大学生命科学学院 

母体文献 Acta Botanica Sinica;植物学报: 英文版 

年卷期 2003,45(7)

页码 858-863

年份 2003 

分类号 Q943.2  Q786 

关键词 麻疯树  基因克隆  原核表达  核糖体失活蛋白基因 

文摘内容 麻疯树(Jatropha curcas L.)核糖体失活蛋白(curcin)是存在于麻疯树种子中的一种毒性较强的蛋白, 它与蓖麻毒蛋白和相思子毒蛋白的性质相似, 属I型核糖体失活蛋白。从麻疯树种子中分离得到一种分子量为28.2kD的蛋白质, 其对无细胞系统中蛋白质合成的抑制活性较强, IC50为(O.19±O.01)nmol/L, 具有RNA N-糖苷酶活性。依据Curcin的N端部分氨基酸设计简并引物, 通过RT～PCR和5^+-RACE技术从未成熟种子总RNA中克隆到Curcin全长cDNA序列。该cDNA全长由I 173个碱基组成, 包含一个编码293个氨基酸的前体蛋白, 前42个氨基酸为信号肽。推测的多肽序列与测定的蛋白质N端序列相同, 与多种已发表的I型核糖体失活蛋白和II型核糖体失活蛋白的A链有一定的同源性。将curcin的编码区与表达载体pQE-30相连后, 转入大肠杆菌(Escherichia coil)M15菌株中得到了有效的表达。将表达的融合蛋白纯化后发现, 它具有抑制无细胞系统蛋白质合成的能力。