麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆和表达(英文)

编号 zgly0001273376

文献类型 期刊论文

文献题名 麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆和表达(英文)

作者 林娟  陈钰  徐莺  颜钫  唐琳  陈放 

作者单位 四川大学生命科学学院  四川大学生命科学学院 成都 610064  成都 610064  成都 610064 

母体文献 Acta Botanica Sinica 

年卷期 2003年07期

年份 2003 

分类号 Q943 

关键词 麻疯树  麻疯树核糖体失活蛋白  RNA N-糖苷酶  基因克隆  原核表达 

文摘内容 麻疯树（Jatropha curcas L.）核糖体失活蛋白（curcin）是存在于麻疯树种子中的一种毒性较强的蛋白,它与蓖麻毒蛋白和相思子毒蛋白的性质相似,属Ⅰ型核糖体失活蛋白。从麻疯树种子中分离得到一种分子量为28.2kD的蛋白质,其对无细胞系统中蛋白质合成的抑制活性较强,IC50为（0.19±0.01）nmol/L,具有RNA N-糖苷酶活性。依据curcin的N端部分氨基酸设计简并引物,通过RT-PCR和5′-RACE技术从未成熟种子总RNA中克隆到curcin全长cDNA序列。该cDNA全长由1 173个碱基组成,包含一个编码293个氨基酸的前体蛋白,前42个氨基酸为信号肽。推测的多肽序列与测定的蛋白质N端序列相同,与多种已发表的Ⅰ型核糖体失活蛋白和Ⅱ型核糖体失活蛋白的A链有一定的同源性。将curcin的编码区与表达载体pQE-30相连后,转入大肠杆菌（Escherichia coil）M15菌株中得到了有效的表达。将表达的融合蛋白纯化后发现,它具有抑制无细胞系统蛋白质合成的能力。