正交设计优化胡萝卜ISSR-PCR反应体系

编号 zgly0001460041

文献类型 期刊论文

文献题名 正交设计优化胡萝卜ISSR-PCR反应体系

作者 吴春燕  陈赫楠  李静  宋廷宇 

作者单位 吉林农业大学园艺学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S631.2 

关键词 胡萝卜  正交设计  ISSR  PCR反应体系 

文摘内容 为获得适于胡萝卜ISSR-PCR的反应体系,本研究以胡萝卜为试验材料,采用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取胡萝卜嫩叶DNA,利用正交试验设计方法,对ISSR-PCR的5个影响因素:Mg2+、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA进行了研究。结果得到胡萝卜ISSR-PCR的最佳反应体系:25μL的反应体系中含有1.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTP、1.5 U Taq DNA聚合酶、0.2μmol/L引物、50 ng模板DNA。利用优化的反应体系,对最佳反应次数进行了筛选,结果表明优化的反应体系适宜的循环次数是35次。该体系可以为胡萝卜遗传多样性分析、基因定位等提供理论依据。