编号 zgly0001540290
文献类型 期刊论文
文献题名 基于环介导等温扩增技术检测雪松疫霉根腐病菌
作者单位 苏州出入境检验检疫局 南京农业大学 昆山出入境检验检疫局
母体文献 植物检疫
年卷期 2017年01期
年份 2017
分类号 S763
关键词 雪松疫霉根腐病菌 Ypt1 环介导等温扩增 羟基萘酚蓝 检测
文摘内容 雪松疫霉根腐病菌(Phytophthora lateralis Tucker et Milbrath)是一种重要的毁灭性植物病原菌,也是我国进境植物检疫性有害生物。目前,我国未有该病害发生的报道,为了防止P.lateralis的传入和扩散,需对其进行快速、准确的检测。本文利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),以Ypt1基因为靶标序列,设计LAMP特异性引物,建立LAMP反应体系,并对灵敏度和特异性进行检测。结果表明:整个检测过程仅需80 min,即可通过肉眼观察直接判定检测结果。在特异性检测中,P.lateralis菌株都能观察到天蓝色的阳性反应,而其他疫霉菌和真菌供试菌株均呈阴性反应。在灵敏度检测中,最低检测限为100 pg/μL。该方法的建立为P.lateralis的检疫鉴定及其所致病害的快速诊断提供了新技术。