山地杨MD-110原生质体的分离技术

编号 zgly0000552669

文献类型 期刊论文

文献题名 山地杨MD-110原生质体的分离技术

学科分类 220.1510;林木育种学

作者 蒋祥娥  蔡桁  赵弘越  冈村政则 

作者单位 湖北省林木育种科学技术中心  湖北省武昌实验中学 

母体文献 湖南林业科技 

年卷期 2008,(1)

页码 14-15

年份 2008 

分类号 S722.37 

关键词 山地杨MD-110  原生质体  分离技术  酶解  纯化  培养 

文摘内容 山地杨MD—110(P.maximowiczii×P.deltoides)是黑杨派与青杨派的优良杂交品种。选择生长约1个月无菌苗的健壮叶片(长1．5～2cm)，切成长约0．5mm的细条，在2％纤维素酶RS、0．05％果胶酶Y-23、0．6M甘露醇(pH=5．6)组成的酶液进行分离，分离出大量的具有活力的原生质体，且大小均匀，细胞膜完整；酶解2h后轻轻摇动培养皿利于酶解，酶解时间以6h为宜。纯化后其原生质体的产量为3．6×10^7／gfr．wt，活力可达90％以上。纯化后的原生质体在B5(2倍浓度)培养基，附加2，4-D10mg·L^-1、NAA0．2mg·L^-1和BAP1mg·L^-1中进行高密度液体浅层培养。