山地杨MD—110原生质体的分离技术

编号 zgly0001331660

文献类型 期刊论文

文献题名 山地杨MD—110原生质体的分离技术

作者 蒋祥娥  蔡桁  赵弘越  冈村政则 

作者单位 湖北省林木育种科学技术中心  湖北省武昌实验中学  湖北省林木育种科学技术中心 湖北武汉430079  湖北武汉430079  湖北武汉430061 

母体文献 湖南林业科技 

年卷期 2008年01期

年份 2008 

分类号 S792.11 

关键词 山地杨MD—110  原生质体  分离技术  酶解  纯化  培养 

文摘内容 山地杨MD—110(P.maximowiczii×P.deltoides)是黑杨派与青杨派的优良杂交品种。选择生长约1个月无菌苗的健壮叶片(长1.5~2 cm),切成长约0.5 mm的细条,在2%纤维素酶RS、0.05%果胶酶Y—23、0.6 M甘露醇(pH=5.6)组成的酶液进行分离,分离出大量的具有活力的原生质体,且大小均匀,细胞膜完整;酶解2 h后轻轻摇动培养皿利于酶解,酶解时间以6 h为宜。纯化后其原生质体的产量为3.6×107/gfr.wt,活力可达90%以上。纯化后的原生质体在B5(2倍浓度)培养基,附加2,4—D 10 mg.L-1、NAA 0.2 mg.L-1和BAP 1 mg.L-1中进行高密度液体浅层培养。