编号 zgly0001298728
文献类型 期刊论文
文献题名 Cry1 Ac基因载体构建及其在枯草芽孢杆菌中的杀虫活性表达
作者单位 江苏省农业科学院 中国热带农业科学院 南京210014中国热带农业科学院 海南儋州571737 南京210014 海南儋州571737
母体文献 昆虫学报
年卷期 2005年03期
年份 2005
分类号 Q782
关键词 苏云金芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 重迭PCR Cry1Ac基因 杀虫活性
文摘内容 根据苏云金芽孢杆菌BacillusthuringiensisHD73基因Cry1Ac和枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis木糖诱导型启动子PxylR序列,分别设计2对特异引物Cry1AcFR和PxyFR,扩增获得了完整的启动子PxylR和Cry1Ac基因序列,进一步以上述产物混合物为模板,以PxyFCry1AcR作引物进行重迭PCR,获得了载体PxylRCry1Ac,经SphⅠ和BamHⅠ完全酶切后,将PxylRCry1Ac插入大肠杆菌苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,重组表达质粒pCry1Ac315转化枯草芽孢杆菌感受态细胞。工程菌株质粒酶切电泳分析、SDSPAGE电泳分析和杀虫生物活性测定结果证实了Cry1Ac基因的导入及其在枯草芽孢杆菌JAAS01D中的有效表达。