马腺疫链球菌FNE基因的克隆及原核表达

编号 zgly0001469471

文献类型 期刊论文

文献题名 马腺疫链球菌FNE基因的克隆及原核表达

作者 徐全圆  刘建华  苏艳  加尔肯  王世民  冉多良 

作者单位 新疆农业大学动物医学学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年12期

年份 2014 

分类号 S852.61 

关键词 马腺疫链球菌  FNE基因  序列分析  原核表达 

文摘内容 采用PCR方法从马腺疫链球菌新疆分离株中扩增FNE基因片段,克隆至pMD19-T载体。利用分子生物学软件分析测序结果,将FNE截短基因亚克隆至原核表达载体pET-30a中,转化到大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导FNE重组蛋白的表达,用SDS-PAGE和Western blot法分析蛋白表达及其反应原性。序列分析显示,其与GenBank收录的马腺疫链球菌4047(登录号YP002747216)核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为99%。采用PCR法扩增到675bp的FNE截短基因片段构建重组表达载体获得重组蛋白,经SDS-PAGE分析在46ku处出现明显条带,Western blot分析显示具有反应原性。成功克隆和表达了马腺疫链球菌的FNE截短基因,为重组FNE蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。