松褐天牛泛素基因的克隆及表达

编号 zgly0000639863

文献类型 期刊论文

文献题名 松褐天牛泛素基因的克隆及表达

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 林同  张宇宏  常润磊  张琪  温秀军 

作者单位 华南农业大学林学院  华南农业大学经济林研究中心 

母体文献 林业科学 

年卷期 2009,45(9)

页码 101-105

年份 2009 

分类号 S718.7 

关键词 松褐天牛  泛素  基因克隆  序列分析  原核表达 

文摘内容 设计一对简并引物,应用RT-PCR技术,从松褐天牛细胞中克隆泛素基因的编码区,GenBank登录号EU433567。序列分析表明：该编码区的长度为228bp,编码76个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为8.49ku,理论等电点为5.83。同源性比较发现,松褐天牛泛素基因与其他10种昆虫泛素基因在氨基酸水平上具有94%～98%的相似性。基于核苷酸水平上的系统发育树显示松褐天牛与斜纹夜蛾、草地贪夜蛾遗传距离较近;通过同源建模获得了松褐天牛泛素基因编码蛋白的理论三维结构。将泛素基因与pET-32a（＋）连接,构建原核表达载体pET-32a-ub,经IPTG诱导,松褐天牛泛素基因在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达,并经Westernblotting分析验证该表达,为研究泛素在松褐天牛体内的功能奠定基础。