西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用

编号 zgly0001673802

文献类型 期刊论文

文献题名 西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用

作者 焦楠  朱宁  程春振  林玉玲  李汉生  陈发兴  赖钟雄 

作者单位 福建农林大学园艺植物生物工程研究所 

母体文献 果树学报 

年卷期 2019年07期

年份 2019 

分类号 S667.9 

关键词 西番莲  夜来香花叶病毒  黄瓜花叶病毒  病毒检测  双重RT-PCR技术 

文摘内容 【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒（Telosma mosaic virus, TeMV）和黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白（coat protein, CP）基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L-1和8.0 mmol·L-1;最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品c DNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。