家蚕酪氨酸羟化酶His394突变对酶结构和活性的影响

编号 zgly0001447915

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕酪氨酸羟化酶His394突变对酶结构和活性的影响

作者 张振旺  贡成良  许维岸  韩宏岩 

作者单位 苏州大学基础医学与生物科学学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2013年03期

年份 2013 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  酪氨酸羟化酶  定点突变  活性  结构  稳定性 

文摘内容 酪氨酸羟化酶作为儿茶酚胺类合成的限速酶,是人类、哺乳动物和昆虫新陈代谢不可或缺的酶类。以家蚕(Bombyxmori)酪氨酸羟化酶(BmTH)为研究对象,分析其氨基酸位点突变对酶结构与活性的改变,为研究酪氨酸羟化酶的功能位点以及表达调控提供依据。利用重叠延伸PCR技术将BmTH蛋白质序列的第394位氨基酸残基组氨酸(His394)突变为谷氨酰胺(Gln),成功获得家蚕酪氨酸羟化酶突变型BmTH-H394Q。BmTH-H394Q的活性仅为野生型BmTH活性的38%,且其热稳定性降低,易于聚沉;荧光光谱分析His394突变为Gln使酪氨酸羟化酶的色氨酸和疏水基团暴露增多;圆二色光谱分析显示BmTH-H394Q的α-螺旋结构含量减少了9.6个百分点,而β-折叠结构含量上升了8.0个百分点。据此可以推测,BmTH的氨基酸位点His394对酶的活性和结构稳定性起着重要作用,是维持其结构和功能所必需的基团。