编号
zgly0000563713
文献类型
期刊论文
文献题名
采用AFLP分析齐口裂腹鱼DNA指纹的技术探讨
作者单位
四川省农业科学院分析测试中心
中国医学科学院输血研究所
四川大学生命科学学院
母体文献
中国测试技术
年卷期
2008,34(1)
页码
125-127
年份
2008
分类号
Q523
Q959.483
关键词
AFLP
基因组DNA制备
条件优化
银染
文摘内容
AFLP(选择性扩增片断长度多态性)指纹技术被认为是当今最有效的DNA指纹分析技术之一,但是由于该技术操作流程较长,对模板DNA质量要求较高以及PCR反应成分等变数条件的影响,要获得高清晰的DNA指纹图谱比较困难。文中以齐口裂腹鱼为研究对象,对AFLP的分析条件作了一定的探索。结果表明:基因组DNA必须是高纯度、高分子量;酶切充分;PCR反应最佳条件为:引物E—XYZ,M—XYZ在体系中的浓度分别为1ng/mL,5ng/mL;dNTPs浓度为0.2mmol/L;MgCl2浓度为1.9mmol/L。银染时在NaOH条件下显色比在传统银染法中的Na2CO3条件下显色,图谱背景更干净,条带更清晰。