烟草PR10蛋白生物活性及赤星病菌Alternaria alternata诱导下的表达分析

编号 zgly0001639079

文献类型 期刊论文

文献题名 烟草PR10蛋白生物活性及赤星病菌Alternaria alternata诱导下的表达分析

作者 张玉  王杰  周世奇  郑甜甜  罗成刚  王元英 

作者单位 中国农业科学院烟草研究所  中国农业科学院研究生院 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2018年03期

年份 2018 

分类号 S435.72 

关键词 烟草  PR10蛋白  原核表达  活性  表达 

文摘内容 为深入研究植物PR10蛋白的生物学功能,以烟草PR10蛋白(NtPR10)为研究对象,采用冷休克蛋白表达载体p Cold II,构建烟草PR10融合蛋白原核表达系统,优化表达及纯化条件,获得高纯度NtPR10融合蛋白;分别采用底物法和滤纸片法体外分析其核酸酶活性及抑菌活性;并利用荧光定量PCR方法分析了烟草赤星病菌Alternaria alternata侵染下,NtPR10基因在抗、感烟草品种内不同时间点的表达差异。结果表明,15℃、0.1 mmol/L IPTG过夜条件下可诱导获得大量可溶性目的蛋白,50、100 mmol/L咪唑缓冲液洗脱能够获得较高纯度的目的蛋白;纯化后的NtPR10蛋白能够降解烟草总RNA,具有核酸酶活性,且1.0、0.5、0.25μg/μL的NtPR10蛋白溶液均对烟草赤星病菌的菌丝生长具有显著的抑制作用,但随着蛋白浓度的降低,抑菌作用减弱;荧光定量PCR结果显示,接种烟草赤星病菌后,NtPR10基因在感病品种和抗病品种中均显著上调表达,但其在抗病品种的响应速度和表达量显著高于感病品种,表明NtPR10应答了烟草赤星病菌的侵染过程。