银杏HDR基因的克隆与功能分析

编号 zgly0000708137

文献类型 期刊论文

文献题名 银杏HDR基因的克隆与功能分析

学科分类 220.45;经济林学

作者 杨颖舫  杨春贤  冯国庆  成瑜  李郑娜  陈敏  廖志华 

作者单位 西南大学生命科学学院  西南大学药学院 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2010(13)

页码 6663-6665,6705

年份 2010 

分类号 Q943.2 

关键词 HDR基因  基因克隆  β-胡萝卜  功能互补  银杏 

文摘内容 [目的]获得银杏HDR基因的克隆并研究HDR基因的功能。[方法]采用RT-PCR技术获得银杏HDR的全长cDNA,命名为Gb-HDR(GenBank登录号: DQ364231),该基因cDNA全长为1827bp,包含1425bp的开放阅读框,编码474个氨基酸残基的蛋白;并构建GbHDR的原核表达载体pTrcGbHDR,与原核表达载体pAC-BETA共转入大肠杆菌XL1-Blue,获得β-胡萝卜素工程菌。[结果]克隆获得实际长度为1441bp的GbHDR基因,该序列包含1425bp的HDR基因ORF,编码474个氨基酸残基的蛋白,其预测分子量为53.2kD,等电点预测为5.76。功能互补分析表明,GbHDR能推动工程菌XL1-Blue+pTrcGbHDR+pAC-BETA超量表达β-胡萝卜素,在颜色互补平板上呈现β-胡萝卜素特有的橘黄色,证实GbHDR具有典型的HDR基因功能。[结论]获得1株可高量积累β-胡萝卜素的大肠杆菌工程菌,为最终实现β-胡萝卜素代谢工程提供侯选基因和作用靶点。