三个方便实用的植物表达载体构建与验证

编号 zgly0001478432

文献类型 期刊论文

文献题名 三个方便实用的植物表达载体构建与验证

作者 殷桂香  赵佩  郝浩楠  李捷琳  杜丽璞  张平治  佘茂云  叶兴国 

作者单位 安徽省农业科学院作物研究所  中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程  长江大学农学院 

母体文献 植物遗传资源学报 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 Q943.2 

关键词 植物表达载体  遗传转化  标记基因  生物安全 

文摘内容 为满足植物功能基因组学研究及转基因安全性需要,本研究根据一些国内外引进或商业化的植物表达载体及其相关元件,构建了3个适合于植物,尤其是单子叶植物转化的表达载体,即p AH006、p WMB022和p WMB025。p AH006载体包含由玉米泛素ubi启动子调控的GUS基因和bar基因的完整T-DNA区域,此区段能够被酶切回收,可用于单子叶植物农杆菌介导转化效率评价及基因枪介导线状DNA转化效果研究;p WMB022载体携带由双35S启动子调控的玉米色素基因Lc和C1,可用作基因枪介导的共转化筛选标记,直观筛选含目标基因转基因材料;p WMB025载体携带由ubi启动子调控的、商业化转基因植物中广泛利用的EPSPS基因,可用于禾谷类作物农杆菌或基因枪介导的遗传转化,载体多克隆位点可通过酶切方式更换目标基因。酶切鉴定结合农杆菌或基因枪介导的小麦幼胚愈伤组织或叶片转化验证此3个载体表明,载体构建正确,其标记基因、可视化基因和报告基因均能正常表达。这3个载体的构建对于小麦等植物转化效率提升、安全型转基因作物获得和植物功能基因组学研究等具有重要意义。