甲型H1N1流感病毒HA蛋白的截短表达、纯化及鉴定

编号 zgly0001400447

文献类型 期刊论文

文献题名 甲型H1N1流感病毒HA蛋白的截短表达、纯化及鉴定

作者 贾园  沈阳  邱亚峰  史子学  邵东华  王晓杜  邓绪芳  王皓婷  赵福广 

作者单位 吉林农业大学  中国农业科学院上海兽医研究所 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年05期

年份 2011 

分类号 S852.659.5 

关键词 甲型H1N1流感病毒  HA蛋白  原核表达 

文摘内容 构建pET表达载体,通过原核表达系统制备甲型H1N1流感病毒HA的截短表达蛋白,获得纯化蛋白,并分析HA蛋白的反应原性。人工合成A/California/04/2009 H1N1流感病毒HA基因,以其为模板,PCR扩增HA的一部分基因,去除HA蛋白信号肽、跨膜区、胞内区的基因序列,仅扩增HA1和HA2的基因。将扩增的基因构建到pET 28(a)质粒上,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达HA蛋白,并经过Ni-NTA His Bind柱对其进行纯化,SDS-PAGE电泳鉴定HA蛋白的表达,Western blot鉴定HA蛋白的反应原性。通过原核表达获得了HA的截短表达蛋白,并制备了较高纯度的蛋白,Western blot显示HA蛋白具有很好的反应原性,为建立甲型H1N1流感病毒检测技术奠定了基础。