甲型H1N1流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立

编号 zgly0001400512

文献类型 期刊论文

文献题名 甲型H1N1流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立

作者 王云龙  周春峰  孙新城  李玉林  陈冬焕  李恒思  昌静峰  王国强  董彩文  刘旺根 

作者单位 河南工业大学  郑州职业技术学院  郑州大学  河南省生物工程技术研究中心 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年08期

年份 2011 

分类号 S855.3 

关键词 血凝素  甲型H1N1流感病毒  原核表达  双抗体夹心ELISA 

文摘内容 建立甲型H1N1流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法,通过优化IPTG浓度和诱导时间确定HA融合蛋白的最佳表达条件,并进行Western bloc和血凝试验鉴定。用纯化蛋白制备单克隆抗体,建立检测甲型H1N1流感病毒的双抗体夹心ELISA检测方法,对其交叉反应、符合率进行验证。结果表明,HA蛋白在BL21(DE3)中得到表达,主要以包涵体的形式存在,分子质量为64 ku,最佳诱导条件为IPTG终浓度0.2 mmol/L,诱导时间4 h。Western blot鉴定其与H1N1病毒有相同的抗原性,血凝试验表明无血凝活性。制备HA单抗并初步建立双抗体夹心ELISA检测方法,检测100份阳性PCR样本,符合率为96%。建立的夹心ELISA方法可用于H1N1亚型流感病毒的初步诊断。