真鲷虹彩病毒LAMP检测方法的建立

编号 zgly0001570905

文献类型 期刊论文

文献题名 真鲷虹彩病毒LAMP检测方法的建立

作者 袁向芬  石素婷  吕继洲  吴绍强 

作者单位 中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2018年01期

年份 2018 

分类号 S943 

关键词 水生动物疫病  真鲷虹彩病毒  环介导等温扩增  快速检测 

文摘内容 为建立一种检测真鲷虹彩病毒的环介导等温扩增(LAMP)方法,满足口岸、养殖场对该病的快速监测的需求,本研究比对分析了Gen Bank中公布的真鲷虹彩病毒基因组序列,筛选其主要衣壳蛋白MCP基因保守区序列,进行LAMP引物设计,建立了真鲷虹彩病毒LAMP检测方法。对扩增条件进行优化,确定最佳反应条件为62℃,45 min。灵敏度试验结果显示,该方法最低检测限为100拷贝/μL目的基因。特异性试验结果显示,该方法不与流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、蛙病毒3型(FV3)、甲鱼虹彩病毒(STIV)发生交叉反应。结果表明,本研究建立的LAMP方法具有良好的敏感性和特异性。对5份疑似真鲷虹彩病毒感染的临床样品进行检测,发现检测结果与世界动物卫生组织(OIE)推荐的PCR方法检测结果符合率为100%。研究表明,本方法具有灵敏度高、特异性强,以及仪器设备简单、操作便捷、结果直观等优点,非常适合作为初筛手段,应用于养殖场、口岸等一线的疫病监测。