万寿菊RAPD分子标记优化体系的建立

编号 zgly0000394840

文献类型 期刊论文

文献题名 万寿菊RAPD分子标记优化体系的建立

作者 沈一岚  续九如  李福荣  张继冲 

作者单位 北京林业大学生物学院 

母体文献 吉林林业科技 

年卷期 2006,35(1)

页码 10-14

年份 2006 

分类号 Q78 

关键词 万寿菊  RAPD  反应体系  正交设计 

文摘内容 以雄性不育和可育万寿菊及其子代为材料, 在PE-2400型PCR仪上进行扩增, 通过3次正交试验设计, 优化得到了最佳的RAPD反应体系, 确定了各个因素的最佳水平。在20μL反应体系中, 最佳的浓度配比为: 10×Buffer中含10.00mmol·L^-1Tris-HCI、50.00mmol·L^-1KCI、0.001%gelatin、dNTPO.25mmol·L^-1、TaqDNA聚合酶1.5U、MgCl21.25mmol·L^-1、DNA20-60ng、引物0.60pmol·μL^-1, 预变性时间5min, 退火温度37℃较好, 1min的延伸时间也满足了2kb以下的DNA片段合成, 循环35次能得到较好的RAPD图谱。