板栗PAPD影响因素的研究

编号 zgly0000248887

文献类型 期刊论文

文献题名 板栗PAPD影响因素的研究

学科分类 220.45;经济林学

作者 项艳  张晓渡 

作者单位 安徽农业大学森林利用学院 

母体文献 经济林研究 

年卷期 2001,19(1)

页码 13-16

年份 2001 

分类号 S664.201  Q75 

关键词 板栗  RAPD分析  PAPD反应体系  模板DNA  TaqDNA聚合酶浓度  变性时间  退火温度 

文摘内容 稳定的RAPD反应体系是进行RAPD分析的关键，分别测试了模板DNA、dNTP、Ｍg^2+、引物、ＴaqDNA聚合酶浓度和变性时间、退火温度及时间、延伸时间、延伸时间、循伸时间、循环次数等对反应结果的影响。通过实验确定了板栗最佳的ＲＡＰＤ反应条件。在５０ul反应体系中含有50ng模板、0.74umol/L随机引物、180umol/LdNTP、3UTaqDNA聚合酶、2.0mmol/LMgCl2。反应扩增程序为：94C预变性5min.40次热循环，每个循环包括：94C变性30sec,36C退火45sec,72C延伸90sec，最后72C终延伸7min。按照优化的RAPD条件进行的重复实验，重现性良好。