太子参芜菁花叶病毒和蚕豆萎蔫病毒的双重RT-PCR检测

编号 zgly0001540220

文献类型 期刊论文

文献题名 太子参芜菁花叶病毒和蚕豆萎蔫病毒的双重RT-PCR检测

作者 匡云波  陈满足  陆伊荣  陈晶  叶祖云 

作者单位 宁德师范学院生物系  福建省特色药用植物工程技术研究中心 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2017年04期

年份 2017 

分类号 S435.675 

关键词 太子参  芜菁花叶病毒  蚕豆萎蔫病毒  双重RT-PCR 

文摘内容 针对不同产地栽培的太子参（Pseudostellaria heterophylla）中主要存在芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus,Tu MV）和蚕豆萎蔫病毒（Broad bean wilt virus,BBWV）侵染且为害严重的情况,建立能同时检测这2种病毒的双重RT-PCR快速检测方法。根据Gen Bank数据库中的Tu MV、BBWV外壳蛋白（coat protein,CP）基因核苷酸序列的保守区域分别设计简并引物,在单一RT-PCR检测体系的基础上,建立和优化双重RT-PCR检测体系。双重RT-PCR的优化结果显示,最佳扩增循环数为35,最佳引物浓度为0.4μmol·L-1,最佳退火温度为51℃。其灵敏度测定结果显示,2种病毒在样品c DNA稀释至原液的10-4倍后仍能扩增出特异条带。应用该方法对7份栽培太子参样品和4份脱毒苗样品进行了检测,结果表明,建立的双重RT-PCR检测方法可稳定、准确、灵敏地同时检测Tu MV和BBWV。