双重RT-PCR快速检测H7N9流感病毒方法的建立

编号 zgly0001495302

文献类型 期刊论文

文献题名 双重RT-PCR快速检测H7N9流感病毒方法的建立

作者 蒋文明  李金平  于美芳  孙文博  王素春  彭程  侯广宇  刘朔  杜翔  于建敏  陈继明 

作者单位 中国动物卫生与流行病学中心  山东省农业科学院畜牧兽医研究所 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2015年05期

年份 2015 

分类号 S852.65 

关键词 流感病毒  H7N9  双重RT-PCR 

文摘内容 为建立简便快速检测H7N9亚型流感病毒的方法,根椐Gen Bank中H7亚型流感病毒的HA基因序列和N9亚型流感病毒的NA基因序列,设计2对特异性引物,在建立H7亚型和N9亚型单项RT-PCR的基础上,优化双重RT-PCR反应条件,建立同时检测H7亚型和N9亚型的双重RT-PCR。对H7N9亚型流感病毒核酸模板进行双重RT-PCR扩增,结果可同时扩增HA基因263bp、NA基因520 bp的特异性片段,而对其他常见亚型的流感病毒的RT-PCR扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,该双重RT-PCR方法的检测下限为3 pg的H7N9病毒模板。利用该双重RT-PCR方法对30份临床样品进行H7N9病毒进行检测,与病毒分离方法进行对比,结果显示,两者的符合率为100%。结果表明建立的双重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、敏感、准确的特点,可用于H7N9流感病毒的同时检测和鉴别诊断,为H7N9亚型流感的有效防控提供技术支撑。