双重RT-PCR法同步检测单头异沙叶蝉携带的两种小麦病毒

编号 zgly0001704102

文献类型 期刊论文

文献题名 双重RT-PCR法同步检测单头异沙叶蝉携带的两种小麦病毒

作者 杜真真  刘艳  王锡锋 

作者单位 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 

母体文献 植物保护 

年卷期 2020年03期

年份 2020 

分类号 S435.121 

关键词 异沙叶蝉  小麦矮缩病毒  小麦黄条纹病毒  双重RT-PCR 

文摘内容 异沙叶蝉可传播小麦矮缩病毒Wheat dwarf virus(WDV)和小麦黄条纹病毒Wheat yellow striate virus(WYSV)两种病毒。本文根据WDV和WYSV的基因序列分别设计两种病毒的特异性引物对,以含有上述两种病毒的异沙叶蝉样品总RNA为模板,以随机引物为3′端通用引物反转录获得cDNA,然后在同一个PCR反应体系加入两对引物,分别得到与预期相符的773 bp和322 bp扩增产物条带。通过对引物浓度、dNTP和rTaq用量以及退火温度等条件进行优化,建立了能在同一异沙叶蝉体内检测WDV与WYSV两种小麦病毒的双重RT-PCR方法。该双重PCR方法特异性强、敏感性高,可以快速准确地在一个体系里同步检测介体昆虫体内的两种病毒,有效地检测虫体内病毒带毒率,这些结果可为病毒预测预报和病害防治提供参考。