免疫小鼠制备植物病毒腹水抗体的研究和应用

编号 zgly0001105243

文献类型 期刊论文

文献题名 免疫小鼠制备植物病毒腹水抗体的研究和应用

作者 张成良  张作芳  陆家理  陈京  宋淑敏  阙晓枫 

作者单位 农业部植物检疫实验所  农业部植物检疫实验所 

母体文献 植物检疫 

年卷期 1989年05期

年份 1989 

关键词 抗体滴度  酶标记物  双抗体夹心法  特异抗体  植物病毒  夹心酶  烟草花叶病毒  大豆花叶病  蚕豆萎蔫病毒  芜菁花叶病毒 

文摘内容 南方菜豆花叶病毒（SBMV）、烟草花叶病毒（TMV）经 PEG 沉淀、差速离心、梯度离心纯化后,以每只鼠0.1、0.5、1 0、1.5、2mg 剂量,每周一次,共三次分别免疫小鼠,末次免疫后8天注射鼠腹水癌细胞(S180),8～13天后鼠腹部膨大,抽取腹水,离心,取上清液,即为特异腹水抗体。实验证明:每只小鼠免疫0.1mg 抗原,获得抗体滴度1:200万（ELISA）;免疫1.5mg,可获得最高滴度1:3200万的特异抗体。同时,还研制了大豆花叶病在毒（SMV）、马铃薯×病毒（PVX）,马铃薯 Y 病毒（PVY）,蚕豆萎蔫病毒（BBWV）、花生矮花病毒（PSV）、芜菁花叶病毒（TuMV）腹水抗体,滴度为1:400万～3200万。一般一只小鼠可以获得20～40ml,最多66ml 腹水抗体,其抗体性质与同种抗原免疫兔、鼠制备的抗血清相同。这是用微量抗原制备多量特异抗体的好方法。用鼠腹水抗体与兔抗血清组合异种动物抗体双夹心酶联试验,可得到与经典的双抗体夹心法相当或略好的检测效果,又不需自制特异抗体酶标记物,适用于检测大量样品,为植物检疫提供一个好的检验手段。