猪2型圆环病毒间接ELISA检测方法研究

编号 zgly0001317275

文献类型 期刊论文

文献题名 猪2型圆环病毒间接ELISA检测方法研究

作者 杨增岐  祝卫国  王旭荣  张涌 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨凌712100  陕西杨凌712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2006年05期

年份 2006 

分类号 S858.28  S854.43 

关键词 猪圆环病毒  ORF2基因  大肠杆菌  表达  ELISA  检测 

文摘内容 应用PCR扩增得到猪2型圆环病毒ORF2基因的3′端约600 bp,该PCV2 ORF2基因已去除终止子,并分别在其上下游添加Kpn Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点。PCR产物用Kpn Ⅰ和 Hind Ⅲ酶切后,与经同样处理过的 pBAD/g Ⅲ B Vector连接,转化TOP10细胞后挑取阳性克隆,经酶切鉴定和测序验证后用L-arabinose诱导进行融合表达,表达的蛋白主要以包涵体存在。经过镍离子亲和层析柱纯化,SDS-PAGE显示1条约28 ku的目的条带, 纯度达到85％以上。以该28 ku的多肽包被酶标板,建立了PCV2的间接ELISA检测方法。