小鼠SIGIRR基因重组腺病毒的构建及鉴定

编号 zgly0001448993

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠SIGIRR基因重组腺病毒的构建及鉴定

作者 梁晓华  王艳  田丰  黄勋  高坤祥  李小飞  姜涛 

作者单位 第四军医大学唐都医院胸腔外科 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年10期

年份 2013 

分类号 R563.8  Q95-33 

关键词 单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白(SIGIRR)  急性肺损伤  腺病毒载体  AdEasyTM  Toll样受体(TLR) 

文摘内容 拟构建小鼠SIGIRR基因重组腺病毒并进行鉴定,为SIGIRR在小鼠急性肺损伤预防及治疗方面的研究提供基础。利用AdEasyTM系统构建SIGIRR基因重组腺病毒,并检测SIGIRR mRNA及蛋白在感染细胞及组织中的表达。通过多次扩增后,大量制备高滴度腺病毒。结果表明,本试验成功构建了携带小鼠源性SIGIRR基因的重组腺病毒表达载体Ad-mSIGIRR,病毒感染滴度为5×1010 pfu/mL,滴度符合下一步试验要求。Western blot和免疫组化方法分别检测到mSIGIRR在体内的高效表达,且经气管滴注感染小鼠后,不会引起正常小鼠肺组织发生病理变化。明确了SIGIRR基因的重组腺病毒可以在小鼠活体内使mSIGIRR过表达,且经气管滴注5×109pfu的病毒感染小鼠后,不会引起正常小鼠肺组织发生病理变化。