津田芜菁隐花色素CRY1 RNA干涉载体的构建

编号 zgly0001460070

文献类型 期刊论文

文献题名 津田芜菁隐花色素CRY1 RNA干涉载体的构建

作者 孙梅  周波  马光  刘明雪  李玉花 

作者单位 东北林业大学花卉生物工程研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2013年03期

年份 2013 

分类号 S631.3 

关键词 芜菁  CRY1  Gateway克隆技术  RNA干涉 

文摘内容 隐花色素CRY1在拟南芥光形态建成及光信号转导中起重要作用,在津田芜菁(Brassica rapaL. subsp. rapa ‘Tsuda’)中是否起相同作用尚未报道。本研究利用实验室已克隆得到的津田芜菁CRY1基因的cDNA全长序列,在NCBI进行序列比对,选取特异的片段。同时根据Gateway克隆技术特点,设计含有attB接头的引物。利用高保真的LA Taq DNA聚合酶,通过PCR方法在目的片段的两端加上attB序列。通过BP反应和LR反应将CRY1基因片段克隆到pH7GWIWG2(I)双元干涉载体。对重组载体pH7GWIWG2(I)-CRY1的鉴定结果表明成功构建了CRY1基因的干涉载体。利用Gateway克隆技术构建植物干涉表达载体简便易行,该结果为遗传转化研究其功能奠定了基础。