转录因子DREB1A基因的克隆与Gateway克隆技术构建植物表达载体

编号 zgly0000549916

文献类型 期刊论文

文献题名 转录因子DREB1A基因的克隆与Gateway克隆技术构建植物表达载体

作者 佟友丽  赵飞  冯君伟  李玉花 

作者单位 东北林业大学花卉生物工程研究所 

母体文献 生物技术通讯 

年卷期 2007,18(2)

页码 205-208

年份 2007 

分类号 Q78 

关键词 转录因子DREB1A  Gateway克隆技术  植物表达载体 

文摘内容 目的：研究转录因子DREB1A在植物抗渗透胁迫反应中的作用,并探讨利用Gateway克隆技术构建植物表达载体的方法。方法：根据GenBank中登录的DREB1A基因的全长mRNA序列设计引物,克隆了拟南芥的转录因子DREBIA基因。根据Gateway克隆技术的要求,设计含有attB接头的引物,利用高保真的PlatinumpfxDNA聚合酶,通过PCR方法在克隆基因的两端加上B序列。通过BP反应将包含有attB接头的PCR产物克隆到含有attP的donor载体上以产生Entry克隆,通过LR反应将已经重组入Entry载体的DREB1A基因再克隆到pH2GW7双元载体。结果：对重组载体pH2GW7-DREB1A的鉴定结果表明成功构建了DREB1A基因的植物表达载体。结论：利用Gateway克隆技术构建植物表达载体简便易行,该结果为遗传转化研究奠定了基础。