葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化

编号 zgly0001633677

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化

作者 任芳  张尊平  范旭东  胡国君  李正男  董雅凤 

作者单位 中国农业科学院果树研究所国家落叶果树脱毒中心 

母体文献 植物保护 

年卷期 2018年03期

年份 2018 

分类号 S436.631 

关键词 葡萄病毒B  外壳蛋白基因  植物表达载体  烟草  遗传转化 

文摘内容 葡萄病毒B Grapevine virus B（GVB）是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白（coat protein,CP）基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。