白屈菜CmTLP基因克隆及植物转化载体构建

编号 zgly0001717359

文献类型 期刊论文

文献题名 白屈菜CmTLP基因克隆及植物转化载体构建

作者 赵露  苑雪琪  李俊  杨雪梅  魏云洁  许永华 

作者单位 吉林农业大学中药材学院  中国农业科学院特产研究所人参研究室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2020年09期

年份 2020 

分类号 S567.239  Q943.2 

关键词 白屈菜  植物表达载体  抗寒机理  类甜蛋白 

文摘内容 【目的】克隆白屈菜CmTLP基因并进行植物表达载体构建,为进一步研究CmTLP基因的功能及探索耐寒抗寒药用植物分子育种奠定基础。【方法】基于白屈菜转录组数据,分析得到白屈菜TLP基因开放阅读框,以18S RNA为内参基因,采用qRT-PCR法检测CmTLP基因在不同温度(20(CK),10,0,-7,-20℃)下白屈菜植株中的相对表达量。用RT-PCR法克隆该基因并构建植物表达载体,电击法转化根癌农杆菌。【结果】qRT-PCR结果表明,CmTLP基因在-7℃、12 h时,相对表达量最高;-7℃、24 h时,相对表达量最低。克隆白屈菜TLP基因,命名为CmTLP。该基因开放阅读框长度为696 bp,编码由231个氨基酸组成的肽链;分子质量为24.66 ku,为酸性蛋白。系统发育树表明,CmTLP基因与博落回、月季、胡桃的氨基酸序列有较高的同源性。构建了植物表达载体pRI201-AN-CmTLP,并成功转化根癌农杆菌。【结论】克隆了白屈菜CmTLP基因,构建植物表达载体pRI201-AN-CmTLP,并成功转化根癌农杆菌。